Klonalne proliferacje komórek zakażonych wirusem Epsteina-Barr w preinwazyjnych zmianach związanych z rakiem nosogardzieli ad 5

Fragmenty restrykcyjno-enzymatyczne końców kolistego episomalnego DNA można wykryć za pomocą sond z obu końców liniowego genomu. 5 W infekcji monoklonalnej, skondensowane końce dają pojedynczy fragment enzymu restrykcyjnego, podczas gdy wiele zfuzowanych fragmentów sugeruje zakażenie poliklonalne . Mniejsze fragmenty, które nie hybrydyzują z obydwoma sondami, reprezentują liniowe genomy wytwarzane przez replikację wirusa Rycina 3. Rycina 3. Wykrywanie DNA EBV w pięciu próbkach tkanek z neo-prezbytniczą neoplazją (próbki 3, 5, 6, 9 i 11). Read more „Klonalne proliferacje komórek zakażonych wirusem Epsteina-Barr w preinwazyjnych zmianach związanych z rakiem nosogardzieli ad 5”

Klonalne proliferacje komórek zakażonych wirusem Epsteina-Barr w preinwazyjnych zmianach związanych z rakiem nosogardzieli czesc 4

EBER były obecne we wszystkich niedojrzałych komórkach zmiany, ale nie w podścielisku podstawnym (Figura 1B). EBER znaleziono również w próbce tkanki (próbka 10) z ciężką dysplazją błony śluzowej jamy nosowo-gardłowej. Dysplazja wykazała dowody na różnicowanie w najwyższych warstwach nabłonka (ryc. 1C); EBER wykryto w większości komórek, w tym niektórych zróżnicowanych komórek (Figura 1D). LMP-1 jest jedynym białkiem EBV o właściwościach transformujących w liniach komórek gryzoni i ma zasadnicze znaczenie dla unieśmiertelniania limfocytów B in vitro.17,18 Białko to wykryto w około 60 procentach próbek tkanek od pacjentów z rakiem nosogardzieli.19,20 W przypadku barwienia immunohistochemicznego znaleziono LMP-1 we wszystkich komórkach we wszystkich sześciu badanych próbkach (Tabela 1). Read more „Klonalne proliferacje komórek zakażonych wirusem Epsteina-Barr w preinwazyjnych zmianach związanych z rakiem nosogardzieli czesc 4”

Klonalne proliferacje komórek zakażonych wirusem Epsteina-Barr w preinwazyjnych zmianach związanych z rakiem nosogardzieli cd

Produkty PCR rozdzielono przez elektroforezę w żelu agarozowym i przeniesiono na nitrocelulozę, po czym przeprowadzono hybrydyzację z sondami oligonukleotydowymi znakowanymi końcem 32P. Wyniki
Wykrywanie In situ EBV
Tabela 1. Tabela 1. Dane dotyczące zakażenia EBV w 11 próbach przedinwazyjnych zmian u pacjentów z rakiem nosogardzieli. Przedinwazyjne uszkodzenia analizowano pod kątem transkryptów genów EBV i białek EBV za pomocą hybrydyzacji in situ i barwienia immunohistochemicznego. Read more „Klonalne proliferacje komórek zakażonych wirusem Epsteina-Barr w preinwazyjnych zmianach związanych z rakiem nosogardzieli cd”

Klonalne proliferacje komórek zakażonych wirusem Epsteina-Barr w preinwazyjnych zmianach związanych z rakiem nosogardzieli ad

Tak więc 11 próbek dysplazji lub raka in situ – 8 z Malezji i 3 z Chin – przeanalizowano pod kątem obecności wirusa EBV. Ze względu na zwiększoną świadomość raka nosogardzieli u malezyjskich Chińczyków, biopsje nosogardła są wykonywane u wielu pacjentów z objawami klinicznymi. Z kolekcji próbek tkanek pobranych od takich pacjentów, jako próbki kontrolne użyto 60 próbek zdrowej tkanki nosowo-gardłowej zidentyfikowanych w badaniu przesiewowym. Te próbki normalnego nabłonka uzyskano od pacjentów w klinice ucha, nosa i gardła, którzy byli obserwowani przez dwa lata bez śladów raka.
Hybrydyzacja in situ RNA kodowanego EBV
Utrwaloną formalnie, zatopioną w parafinie tkankę umieszczono na szkiełkach wstępnie traktowanych x roztworem Denhardta (0,02% Ficollu, 0,02% poliwinylopirolidonu i 0,02% albuminy surowicy bydlęcej) i 1% poli-L-lizyny lub 2% organosilanu. Read more „Klonalne proliferacje komórek zakażonych wirusem Epsteina-Barr w preinwazyjnych zmianach związanych z rakiem nosogardzieli ad”